Wechselwirkung von tropomyosin mit dem komplex aus f-actin und schwerem meromyosin

Translated title of the contribution: Interaction of tropomyosin with f-actin-heavy meromyosin complex

Danuta SzczȨsna, Yurii S. borovikov, Irena Kakola, Apolinary Sobieszek

Research output: Contribution to journalArticlepeer-review

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Abstract

Der Effekt von phosphorylierten und dephosphorylierten, Ca2**- oder Mg2**-gesättigten schweren Meromyosinen (HMMs) auf die Bindung von Tropomyosin an F-Actin und auf die Konformationsänderung, die Tropomyosin beim Actin bewirkt, wurde untersucht. Die experimentellen Daten wurden auf der Basis des Modells einer kooperativen Bindung von Tropomyosin an F-Actin mit überlappenden Bindungsstellen analysiert. Im allgemeinen erhöhte die Bindung beider HMMs an das F-Actin die Tropomyosin-bindende Affinität etwa 100fach, verminderte aber gleichzeitig die Kooperativität der Bindung. In Gegenwart von Ca2** und Abwesenheit von ATP war die “Doppel-Nachbarschaftsbindung”(K1x ω2) für mit dephosphoryliertem HMM gesättigtes Actin dreimal so stark wie für solches mit phosphoryliertem HMM. Unter sonst gleichen Bedingungen, aber in Abwesenheit von Ca2** trat der umgekehrte Effekt ein, aber nur mit einem Faktor von 1.5. Die Bindungsstöchiometrie von Tropomyosin zu Actin betrug 7:1 in Gegenwart von dephosphoryliertem HMM, gesättigt mit Ca2** oder phosphoryliertem HMM, gesättigt mit Mg2**, und tendierte zu einem Wert von 6:1 für beide nach Austausch des an die Myosinköpfe gebundenen Kations. Es wurde auch gefunden, daß gebundenes HMM die Fluoreszenz-Polarisierung von 1,5-IAEDANS-markiertem und mit F-Actin komplexgebundenem Tropomyosin in Muskel-,,Geist “-Fasern beeinflußt. In Gegenwart von Ca2** nahm die Menge der statistisch angeordneten Tropomyosin-Fluorophoren ab, wenn dephosphoryliertes HMM an,, Geist ”-Fasern gebunden wurde. Im Gegensatz dazu wurde mit phosphoryliertem HMM eine Zunahme beobachtet. Auf diese Weise induzierte HMM Konformationsänderungen des Tropomyosin im Actin-Tropomyosin-Komplex, die eine veränderte geometrische Anordnung von Tropomyosin und Actin zur Folge hatten.

Translated title of the contributionInteraction of tropomyosin with f-actin-heavy meromyosin complex
Original languageGerman
Pages (from-to)399-408
Number of pages10
JournalBiological Chemistry Hoppe-Seyler
Volume370
Issue number1
DOIs
StatePublished - Jan 1 1989
Externally publishedYes

Keywords

  • F-actin as one-dimensional binding lattice
  • effect of light chain phosphorylation
  • heavy meromyosin-actin complex
  • tropomyosin interaction

ASJC Scopus subject areas

  • Biochemistry

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